背景：

岩藻糖是许多寡糖（O或N-连）和多糖结构以及糖蛋白和糖脂的重要组成部分，它们通常与各种生物事件有关，包括受精、胚胎发生、细胞凋亡、信号转导和疾病进展，如类风湿性关节炎、炎症、癌症及囊性纤维化。糖缀合物的去岩藻糖基化是了解糖缀合物生物学效应的重要过程。

概述：

α1-2岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外糖苷酶，它催化从低聚糖中水解线性α1-2连接的l -岩藻糖基（线性底物被定义为相邻的残基上没有分支）。

图 1 底物特异性

Rhinogen^® α1-2 岩藻糖苷酶是利用大肠杆菌系统表达并经过多步层析纯化得到的重组糖苷酶，分子量大小约为 97.7kD。中性条件具有活性，在 37℃下获得最佳反应活性。 根据消化底物不同可适当延长反应时间。

产品包装：

Rhinogen^® α1-2 Fucosidase（α 1-2岩藻糖苷酶）包装规格如下：

产品储存于 50 mM NaCl，20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5 中，不添加防腐剂。

满足 1 mg 糖蛋白去岩藻糖基化需求。

配套试剂:

Rhinogen^® α1-2 Fucosidase（α 1-2岩藻糖苷酶）配套提供的试剂如下：

产品来源:

重组表达于E. coli，理论分子量约97.7KD，C端带6×His标签。

产品质量：

SDS-PAGE分析，纯度≥95%；没有检测到污染的外切糖苷酶、糖苷内切酶及蛋白酶活性。

产品特性：

α1-2 岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外切糖苷酶，可催化水解糖蛋白或游离寡糖上α1-2 连接的岩藻糖。

酶活定义：

当在 20 mM Tris pH 6.8 中，在 37℃下孵育 30 分钟时，一个单位的 α 1-2岩藻糖苷酶可从的 11 nmol 2'-fucosyllactose中水解≥90%岩藻糖。

保藏条件：

1. 采用冰袋运输， 收到产品后请立即将酶置于2-8℃；配套试剂置于-20℃储存。

2. 本品不含防腐剂，务必确保无菌操作取用，避免污染。

应用：

1. 聚糖结构分析；

2. 治疗性重组蛋白的表征及质量控制；

3. 消除糖蛋白的异质性。

特性：

Rhinogen^® α1-2 Fucosidase是一种高度纯化和非常稳定的外切糖苷酶，具有稳定性高、与下游检测兼容等特点。

1. 高纯度：没有污染蛋白酶/其它糖苷酶，纯度≥95％；

2. 高稳定性：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性；

3. 与下游 HPLC、质谱兼容：不含甘油，酶切体系与 HPLC 及质谱工作流程环境兼容。

推荐使用方法：

1. 配制反应缓冲液（20mM Tris，pH6.8）：将10×Glyco 缓冲液3稀释至1×；

2. 使用反应缓冲液将糖蛋白底物调整至0.5-5.0mg/ml；

3. 以1U α1-2岩藻糖苷酶/1μg糖蛋白（或100nM寡糖）的比例添加α1-2岩藻糖苷酶；

4. 37℃孵育1-2h。

操作说明：

1. 对于不同的糖蛋白样品，需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间；

2. 反应可以线性放大或缩小；

注意事项：

本产品仅供研究使用，不适用于人或动物的诊断及治疗用途。